TGF-beta诱导的CD4+Foxp3+调节性T细胞治疗胶原诱导性关节炎的基础研究

调节性T细胞在类风湿性关节炎（RA）的治疗中发挥一定作用。通常以天然调节性T细胞（nTregs)对胶原诱导性关节炎（CIA）小鼠进行预防和治疗。但前期研究发现nTregs在炎症环境下的不稳定性影响了其治疗效果，而体外由TGF-β诱导的调节性T细胞（iTregs）在炎症环境下的稳定性明显优于nTregs，并能保留免疫抑制功能。因此，本课题拟采用抗原特异性的CII TCR转基因小鼠、Foxp3-GFP基因敲入小鼠及二者的杂交小鼠来制备Tregs，体外比较nTregs和iTregs的稳定性和功能。利用CIA小鼠模型，体内观察对细胞、体液免疫应答水平的影响。进一步探讨iTregs与Th17、树突状细胞（DC）之间的"对话"，即iTregs能否通过抑制Th17，诱导DC的耐受来发挥作用，揭示iTreg治疗RA的可能机制，为临床转化奠定基础。

类风湿性关节炎（Rheumatoid Arthritis，RA）是以慢性、进展性和侵蚀性关节炎为特点的一类自身免疫性疾病，最终表现为骨质的破坏、关节的畸形，致残率极高。目前RA的治疗以免疫抑制剂为主，但治疗的副作用较大。..已知CD4+CD25+Foxp3+的天然调节性T细胞（Natural Ocurring Regulatory T Cells, nTregs）数量的减少和/或功能的降低与RA的发病有关。同时，TGF-β诱导的调节性T细胞（Induced Regulatory T cells，iTregs）不仅具有与nTregs相同的表型和抑制关节炎发病的功能，而且在体外促炎症因子白介素-6（Interleukin 6，IL-6）的作用下能表现出更强的稳定性和对效应性T淋巴细胞的抑制力。因此，本课题旨在揭示iTreg细胞对CIA的预防和治疗作用及其相关机制。..本课题发现：.1）iTregs拥有与nTregs相似的表型和对T淋巴细胞增生的抑制能力；同时，对CIA具有与nTregs相似的预防作用；但在已发病的关节炎小鼠，iTregs而非nTregs具有明确的治疗作用且抑制了关节破坏的发生， nTregs则完全丧失了对关节炎的保护作用。.2）iTregs在免疫缺陷和正常小鼠体内环境下，都具有很好的稳定性，与nTregs相似；但在已发病的关节炎小鼠的炎性体内环境下，nTregs易于凋亡并向Th17细胞转化，同时还丧失了其对T淋巴细胞的抑制力；与之相反的是，iTregs能稳定存在，并维持了其对T淋巴细胞的抑制功能。同时，在炎性环境下，iTregs可维持DC细胞的未成熟表型及耐受功能，该“感染耐受”DC细胞具有一定的免疫抑制功能。此外，iTregs对CIA小鼠关节的保护作用，一定程度上得益于其对破骨细胞生成的抑制作用，从而减少了破骨细胞引起的骨质侵蚀和破坏；iTregs对破骨细胞的抑制为细胞接触和NF-κB信号途径所依赖的，并且表现为iTregs剂量相关性的。.3）进一步利用体外培养的耐受型DC联合TGF-β共同诱导iTregs。该联合诱导的iTregs比单纯TGF-β诱导的iTregs具有更强的体外免疫抑制功能和对CIA小鼠关节炎的治疗效果。..本课题为将iTregs用于类风湿性关节炎的细胞治疗提供了理论依据。