IKKbeta-p63途径失调在宫颈癌发生、发展中机制的研究

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一。人乳头状瘤病毒（HPV）感染是导致宫颈癌发生的病因。目前已知HPV致癌的主要分子机制是通过抑制p53和pRb，但p53的同类蛋白p63的作用尚不清楚。p63蛋白在宫颈癌中表达显著升高。但同时存在TAp63和ΔNp63两种功能迥异的亚型，其中TAp63经转基因动物实验证实具有独立于p53之外的抑癌功能，ΔNp63则抑制p53和TAp63活性，促进癌变。本项目组前期研究发现IKKβ 主要使TAp63而非ΔNp63磷酸化，并抑制TAp63转录活性。现拟选择性敲除HPV16阳性宫颈癌细胞株SiHa的E6/E7，研究敲除前后IKKβ、TAp63和ΔNp63表达及活性差异，揭示IKKβ-p63途径在HPV致癌过程中的作用；寻找和鉴定TAp63被IKKβ磷酸化的特异性位点，验证宫颈癌组织中TAp63是否被磷酸化，为探索宫颈癌发病的机制，寻找新的治疗靶点提供新线索。

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，而人乳头状瘤病毒（HPV）感染是导致宫颈癌发生的病因。目前已知HPV 致癌的主要分子机制是通过抑制p53 和pRb，p63 的作用尚不清楚，现就IKKβ、p63在宫颈癌发生、发展中的分子机制的研究做了如下研究：P63、ΔNp63蛋白在宫颈鳞癌及癌旁正常宫颈组织中的表达均与IKKβ表达呈正相关，提示P63和IKKβ在宫颈癌的发生中可能具有协同作用。而IKKβ在不同分期的宫颈病变组织中具有显著性的差异表达，提示其可能在宫颈癌变的启动中有一定作用。HPV16阳性的宫颈癌细胞在E6基因沉默后,细胞内ΔNp63a的表达水平下降,TAp63a的表达水平随之升高,提示ΔNp63a在宫颈癌细胞内可能起着癌基因的作用,促进细胞增殖。TAp63a在宫颈癌细胞内可能起着类似于p53的作用,调控细胞周期,促使细胞凋亡，ΔNp63a和TAp63a在宫颈癌细胞内的功能是相互拮抗的,两者在细胞内的功能失衡可能是导致宫颈癌发生的重要机制。脂多糖能够调节子宫颈癌细胞中IKKβ蛋白表达水平，但与HPV的感染状态相关，而IKKβ抑制剂能够逆转脂多糖的这种影响。继而，通过生物信息学预测磷酸化位点及质谱分析，分析鉴定得到IKKβ磷酸化位点为TAp63γ的S-4及S-12两个位点，但IKKβ不能抑制S4A/S12A双位点突变的TAp63γ转录活性，而是通过对TAp63γ特异位点磷酸化，干扰其与p300蛋白的结合，从而抑制其转录活性。研究显示，IKKβ-p63 途径参与HPV的致癌过程，这也为探索宫颈癌发病的机制，寻找新的治疗靶点提供了新线索。